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　　玩具微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn)?zāi)軌驒z測(cè)玩具表面和內(nèi)部的微生物污染情況，確保玩具在使用過(guò)程中不會(huì)對(duì)兒童健康造成威脅。通過(guò)模擬真實(shí)使用環(huán)境，評(píng)估玩具在特定條件下的微生物生長(zhǎng)情況，可以有效預(yù)防因玩具污染導(dǎo)致的疾病傳播?。

　　玩具微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn)方法步驟

　?。?）?試驗(yàn)準(zhǔn)備?：

　　?試驗(yàn)材料?：需要準(zhǔn)備恒溫培養(yǎng)箱、顯微鏡、滅菌平皿（直徑為9cm）、pH計(jì)、高壓滅菌鍋、酒精燈、錐形燒瓶、量筒、滅菌刻度吸管（10ml、2ml、1ml）、試管等儀器?。

　　?培養(yǎng)基和試劑?：生理鹽水、SCDLP液體培養(yǎng)基、卵磷脂、吐溫80-營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基等?。

　?。?）?微生物準(zhǔn)備?：

　　?菌種選擇?：選擇適當(dāng)?shù)奈⑸镞M(jìn)行挑戰(zhàn)試驗(yàn)，通常選擇雜菌，可以從污染產(chǎn)品中提取菌種?。

　　?菌種培養(yǎng)?：將各菌種接種于合適的培養(yǎng)基中，于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)，挑選典型的菌落于滅菌的液體培養(yǎng)基中，制成一定濃度的細(xì)菌和霉菌混合懸液，置于冰箱冷藏備用?。

　　（3）?試驗(yàn)過(guò)程?：

　　?樣品準(zhǔn)備?：稱取玩具樣品，加入滅菌的容器內(nèi)，加入混合細(xì)菌懸液，充分混勻。每克樣品含細(xì)菌量為5×10^6CFU/克或CFU/ml?。

　　?培養(yǎng)條件?：將樣品置于28℃下培養(yǎng)，定期抽樣檢測(cè)其中殘存的微生物，并根據(jù)微生物的數(shù)量變化情況評(píng)價(jià)樣品的抗菌效果?。

　　?取樣分析?：在接菌的0、7、14、21、28天取樣分析，準(zhǔn)確稱取10克樣品，加入含有玻璃小球和90ml滅菌生理鹽水的錐形瓶?jī)?nèi)，充分震蕩混勻，此懸液為1:10稀釋液；然后再用生理鹽水按1:10依次稀釋，按平板傾注法計(jì)數(shù)樣品中含菌量，細(xì)菌培養(yǎng)37℃下48小時(shí)?。

　?。?）?判定標(biāo)準(zhǔn)?：

　　?通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)?：第28天時(shí)，樣品中含細(xì)菌在10^2cfu/g(ml)-10^3cfu/g(ml)，該樣品有條件地通過(guò)挑戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)，即當(dāng)產(chǎn)品中蛋白質(zhì)或其它動(dòng)植物材料成分不是特別高，同時(shí)生產(chǎn)的衛(wèi)生環(huán)境符合要求，包裝物不易發(fā)生二次污染時(shí)，該防腐體系可以使用?。

　　?高效標(biāo)準(zhǔn)?：從第7天起，樣品中的細(xì)菌<10cfu/g(ml)，說(shuō)明該樣品的防腐體系對(duì)微生物有特強(qiáng)的抑殺作用，通過(guò)挑戰(zhàn)試驗(yàn)?。

　　許多國(guó)家和地區(qū)的安全標(biāo)準(zhǔn)要求對(duì)玩具進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn)，以確保其符合相關(guān)的衛(wèi)生和安全要求。例如，歐盟的EN71-3標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)的ASTMF963標(biāo)準(zhǔn)都要求對(duì)玩具進(jìn)行微生物測(cè)試，以驗(yàn)證其安全性?。